尊龙凯时的YF®488/555/594/647在荧光成像中有什么不同之处？其主要区别在于用于检测EdU的荧光基团不同，从而导致发射的荧光颜色各异。尽管实验效果相似，您可以根据个人的偏好或实验需求进行选择。

在尊龙凯时的EdU试剂盒中，3%BSA in PBS在固定后的作用是什么？在清洁步骤中，BSA可以有效抑制未反应的甲醛，确保实验结果的准确性。

能否在活细胞中进行Click-iTEdU检测呢？答案是否定的。尽管EdU可以用于活细胞的代谢标记，但叠氮化物检测试剂及其缓冲液是非透过型的，因此Click反应必须在已固定且透过的样本上进行。

对于质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应，是否兼容？检测顺序又是怎样的？使用尊龙凯时的试剂时，GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光会受到影响，因此在染色后无法直接检测GFP，建议采用GFP抗体进行间接检测。

观察到较高的本底干扰，这可能是由什么原因造成的？如何降低本底干扰？叠氮化物与炔烃类之间的Click反应非常具选择性，生物体内基本不会产生副反应，因此较高的本底通常源于洗涤不充分。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。此外，您还可以设置一组无染料或无Click反应的对照组，以排除自发荧光干扰。同时，在无EdU的体系中进行完整的Click反应，可以验证Click反应信号的特异性。

为何标记样品信号微弱或几乎没有？该如何提高信号呢？首先，请确保所使用的试剂是无色状态，不要使用变黄的添加剂或缓冲液。其次，为了确保Click反应试剂能够顺利进入细胞核，细胞必须经过充分的固定和通透处理。此外，铜离子会与某些试剂结合，降低Click反应的催化效率，因此在Click反应前，需避免在任何缓冲液或试剂中加入金属螯合剂（如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等），对于含有这些物质的实验样品，可能需要额外的洗涤步骤。最后，仅在铜离子处于适当的化合价（即一价铜Cu+）时，Click反应才会有效。延长Click反应时间至超过30分钟并不会提高信号，建议使用新鲜的Click反应试剂进行再次孵育，时间可设置在30分钟以内以期提高标记效率。

怎样对细胞核进行复染？在尊龙凯时的试剂盒中配备了Hoechst 33342，可用于Click反应后对细胞核进行染色，亦可选择DAPI。此实验是否适用于检测植物细胞核内的DNA复制呢？答案是肯定的，EdU是一种小分子，能够有效穿透植物细胞的细胞壁。